冷冻切片法是借组织在低温下,冻结变硬而达到符合切片要求。冷冻切片法需有冷冻切片机,或在普通切片上配制冷设施。恒冷切片机是高级冷冻切片设备。它有一个恒冷箱,标本致冷台和切片机都装在箱内。恒冷箱的作用类似冰箱,可在一定范围内调整温度,其结构有利于保持箱内恒定低温,减少箱门打开时环境温度的干扰。切片机的轮转把手装在箱外,生物组织切片,便于操纵切片。
冷冻切片法的优点是:在处理得当时,它可以较大限度地保持组织的新鲜状态。并且,由于不需经脱水、透明、浸蜡等过程中**溶剂的处理,及湿箱浸蜡热的影响,甚至可不经固定。所以能很好地保存组织细胞的各种成分和酶的活性,因此在酶的组织化学研究中常用此切片法。
切片
切片时蜡块四周应修切整齐,尤其是上、下缘,要求平行,优质生物切片,否则切片不易连成带状。
以固定于支持器上待切的组织块在室温中应放在冰盒内保持冷却,尤其是在夏季,以保持蜡块的硬度。
为减少切片刀与组织块在切片过程中产生的热量,使石蜡保持合适的硬度,生物切片,切片时可经常用冰块冷却组织块和切片刀。
如室温低或石蜡过硬,切不成片,生物教学切片,可在石蜡块切面上适当加温(如用手指或用热纱布按压蜡块,借助体温或热纱布的热量加温)。
载玻片要保持清洁,并涂抹蛋白甘油(1份甘油+1份鸡蛋清混匀即可),以防止脱片(*组化染色时,用的载玻片应涂抹明胶、树脂胶、APES、多聚赖氨酸等防脱片剂,以增加切片黏附的牢度,防止脱片。)。
蜡块切过后,用熔石蜡封住切面,以利于长期保存。