组织固定后,要除去组织中渗入的固定液和固定液产生的沉淀、结晶、色素等物质,生物切片图片,否则会影响以后的染色效果,该过程即为固定后处理。处理方法要根据固定液来选择,经过中性多聚甲醛固定的组织一般采用流水冲洗24小时来处理(在流水冲洗之前,可对组织块进行适当的修整,便于包埋和切片的制作)。此外,含钙组织,如:骨、牙齿等,生物切片价格,在冲洗之后还应进行脱钙处理。一般采用EDTA对含钙组织尽行脱钙处理,此法对组织无损伤,脱钙速度慢,酶活性保留,对组织抗原损伤小。
常规切片制备的操作流程及要求
㈠社团块依序进行:①水洗,②脱水,③透明,④浸蜡,⑤包埋和⑥切片。 ㈡社团切片制备及其HE染色过程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡等为易燃、有毒物,必须专人管理,甘肃生物切片,2m以内不患上有有焰的火,局部环境应有良好的透风和救火设施。 ㈢常规切片的手工操作(步骤次序和各步骤的持续时间) 1.水洗:用水流冲洗已经固定的社团块30min。 2.脱水(常温下) (1)乙醇-甲醛(AF)液固定 60~120min (2)80%乙醇 60~120min (3)95%乙醇Ⅰ 60~120min (4)95%乙醇Ⅱ 60~120min (5)无水乙醇Ⅰ 60~120min (6)无水乙醇Ⅱ 60~120min (7)无水乙醇Ⅲ 60min [注意事项]①未经充分固定的社团不患上进入脱水程序。②用于脱水的试剂容积应为社团块总体积的5~10倍以上。③自低浓度乙醇向高浓度乙醇逐级移进脱水。④脱水试剂应及时过滤、更换(500ml乙醇可用于500个社团块脱水;加入硫酸铜的无水乙醇变蓝时,提示需要更换)。⑤较大社团块的脱水时间长于较小者,生物切片报价,应将两者分隔进行脱水。⑥社团置于无水乙醇内的时间不宜过长(以免硬化)。⑦丙酮脱水性能强,会使社团块过缩、硬脆,不宜用以替换无水乙醇。